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    美國密理博30cmx3m N+尼龍膜

    美國密理博30cmx3m N+尼龍膜

    產品時間:2021-07-02

    簡要描述:

    美國密理博30cmx3m N+尼龍膜,Immobilon-Ny+ 是一種帶正電的尼龍轉印膜,非常適合于可靠與可重現的轉移、固定、雜交及隨后的重復雜交實驗。

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    美國密理博30cmx3m N+尼龍膜

    Millipore INYC00010,密理博0.45um帶正電荷尼龍膜 30cm*3.3m

    Northern 和 Southern Blotting,以及 Colony 和 Plaque Lifts


    Millipore 提供了一種用于核酸應用轉印膜選擇。 使用帶正電的 Immobilon-Ny+ 轉印膜可以在 Southern blotting、Northern blotting 和 colony/plaque lifts 實驗中獲得出色的結果。 Immobilon-NC Nitrocellulose轉印膜,是主要的 Southern 和 colony/plaque 實驗方案中zui初使用的膜,也可作為一種靈敏度較低但更經濟的選擇。

     

    說明: Immobilon-Ny+ 帶正電尼龍卷膜,0.45 µm,30 cm x 3.3 m

     

    商標名: Immobilon

     

    數量/包裝: 1

     

    應用: Southern blotting、Northern blotting、菌落/噬菌轉印、Dot/Slot blotting 和 DNA 分析

     

    濾膜孔徑,µm: 0.45

     

    相容的染料: Non-applicable

     

    可潤濕性: 親水

     

    主要吸附機制: 離子,紫外線固定后為共價的

     

    濾膜尺寸,cm x cm: 30 x 330

     

    替代物: INCP 000 10(核酸應用)

     

    濾膜代碼: INYC

     

    濾膜顏色: 白色

     

    產品名稱: Immobilon-Ny+ Transfer Membrane

     

    濾膜表面: 光面
     

    Immobilon-Ny+ 帶正電尼龍轉印膜

    Immobilon-Ny+ 是一種帶正電的尼龍轉印膜,非常適合于可靠與可重現的轉移、固定、雜交及隨后的重復雜交實驗。 其表面均一分布的正電荷密度確保得到zui高的靈敏度和zui低的背景信號。 此膜經強化處理具有超長的耐久性,這一點對于重復雜交試驗至關重要。

    可提供詳細的實驗方案,在使用 Immobilon-Ny+ 轉印膜時可用于優化轉印結果。

    美國密理博30cmx3m N+尼龍膜
     

    • 靈敏度zui高,而背景信號zui小
       
    • 非常出色的重復雜交特性
       
    • 在化學發光法和放射性檢測系統中均表現出色

     

    性能

    Southern Blotting

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    直接比較三種帶正電尼龍膜在各自優化實驗方案下的表現:每種膜在其*的紫外波長照射下交聯。 Immobilon-Ny+ 轉印膜的雜交信號是其它兩種膜的 2 倍。

    12 次重復雜交之后的信號強度

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    尼龍膜在 254 nm 交聯,并進行了多次重復雜交,依次為:用 32P 標記探針做 2 次雜交,4 次模擬雜交,用 32P 標記探針做第 7 次雜交,然后進行 5 次模擬雜交以及用 32P 標記探針做第 13 次雜交。 在每個雜交周期之間,將膜置于 0.4M NaOH 溶液中,在 45°C 下洗提 30 分鐘。 模擬雜交與真實雜交完全一樣,區別在于未加 32P 標記探針。 在整個重復雜交過程中, Immobilon-Ny+ 的信號強度是競爭產品 A 和 B 的兩倍。

    檢測靈敏度

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    將凝膠上 DNA 的量減少到 0.01 ng。 0.1 lane(條帶)中的 2.2 和 2.0 kbp 帶分別與 DNA 的 0.48 和 0.42 pg 相對應。 大約相當于 10 µg 人類基因組 DNA 中一個單拷貝基因序列。 可通過對探針濃度加倍來提高靈敏度。 在 0.01 ng 條帶中,與競爭產品 A 相比,Immobilon-Ny+ 轉印膜靈敏度稍高,而背景信號更低。

    用化學發光檢測進行 Northern Blotting

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    鼠肝的全部 RNA (1 µg) 在甲醛瓊脂糖凝膠中電泳分離,然后通過毛細作用轉印到 Immobilon-Ny+ 轉印膜和競爭產品帶正電尼龍膜 “A”。 與烘焙相比,通過紫外交聯固定RNA 能增強信號。 Immobilon-Ny+ 轉印膜比競爭產品 A 表現出更高的靈敏度。

    Colony Lifts

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    將載有 pUC19 或 pLH2(2.0  kbp λ 噬菌體 DNA Hind III 片段克隆至 pUC19)的 JM109 混合細菌懸浮液置于瓊脂培養皿中,在 37°C 下培養過夜。 將培養皿在 4°C 下冷卻30 分鐘,將菌落(直徑大約 1–2 mm)轉印至一片 82 mm 直徑的 Immobilon-Ny+ 圓片膜上,或轉印至競爭產品帶正電的尼龍膜上。 膜上的 DNA 在254 nm, 60,000 µJoules/cm2 紫外光照射下  交聯。 然后用 a 32P 標記的 DNA 探針對膜進行雜交,并使用磷屏成像系統顯色。

    訂貨信息:

    Millipore  INYC00010  N+尼龍膜30cm3m 0.45u  30cm*3m

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